分析原理：凝胶具有化学惰性，它不具有吸附、分配和离子交换作用。让被测量的高聚物溶液通过一根内装不同孔径的色谱柱，柱中可供分子通行的路径有粒子间的间隙（较大）和粒子内的通孔（较小）。当聚合物溶液流经色谱柱（凝胶颗粒）时，较大的分子（体积大于凝胶孔隙）被排除在粒子的小孔之外，只能从粒子间的间隙通过，速率较快；而较小的分子可以进入粒子中的小孔，通过的速率要慢得多；经过一定长度的色谱柱，分子根据相对分子质量被分开，相对分子质量大的在前面（即淋洗时间短），相对分子质量小的在后面（即淋洗时间长）。溶质的淋出体积与其分子量有关，分子量愈大，其淋出体积愈小。

凝胶渗透色谱仪（GPC）

GPC 工作流程图

 凝胶渗透色谱的分离过程是在装有多孔物质为填料的色谱柱中进行的，一个填料的颗料含有许多不同尺寸的小孔（这些小孔具有一定的分布），这些小孔对于溶剂分子来说是很大的，它们可以自由地扩散出入。由于高聚物在溶液中以无规线团的形式存在，且高分子线团也具有一定的尺寸，当填料上的孔洞尺寸与高分子线团的尺寸相当时，高分子线团就向孔洞内部扩散。显然，尺寸大的高聚物分子，由于只能扩散到尺寸大的孔洞中，在色谱柱中保留的时间就短；而尺寸小的高聚物分子，几乎能够扩散到填料的所有的孔洞中，向孔内扩散的较深，在色谱柱中保留的时间就长。因此，不同分子量的高聚物分子就按分子量从大到小的次序着淋洗液的流出而得到分离。

分析原理：凝胶具有化学惰性，它不具有吸附、分配和离子交换作用。让被测量的高聚物溶液通过一根内装不同孔径的色谱柱，柱中可供分子通行的路径有粒子间的间隙（较大）和粒子内的通孔（较小）。当聚合物溶液流经色谱柱（凝胶颗粒）时，较大的分子（体积大于凝胶孔隙）被排除在粒子的小孔之外，只能从粒子间的间隙通过，速率较快；而较小的分子可以进入粒子中的小孔，通过的速率要慢得多；经过一定长度的色谱柱，分子根据相对分子质量被分开，相对分子质量大的在前面（即淋洗时间短），相对分子质量小的在后面（即淋洗时间长）。溶质的淋出体积与其分子量有关，分子量愈大，其淋出体积愈小。

凝胶渗透色谱仪（GPC）

GPC 工作流程图

 凝胶渗透色谱的分离过程是在装有多孔物质为填料的色谱柱中进行的，一个填料的颗料含有许多不同尺寸的小孔（这些小孔具有一定的分布），这些小孔对于溶剂分子来说是很大的，它们可以自由地扩散出入。由于高聚物在溶液中以无规线团的形式存在，且高分子线团也具有一定的尺寸，当填料上的孔洞尺寸与高分子线团的尺寸相当时，高分子线团就向孔洞内部扩散。显然，尺寸大的高聚物分子，由于只能扩散到尺寸大的孔洞中，在色谱柱中保留的时间就短；而尺寸小的高聚物分子，几乎能够扩散到填料的所有的孔洞中，向孔内扩散的较深，在色谱柱中保留的时间就长。因此，不同分子量的高聚物分子就按分子量从大到小的次序着淋洗液的流出而得到分离。

1. 为什么样品要求在指定流动相中溶解性要好？

因为GPC（凝胶渗透色谱）本质上是一个色谱测试，是通过色谱柱分离不同分子量的成分，溶解性不好的话是需要过滤后测试的，不溶成分的分子量就无法测试，而且如果样品溶解度差的话，样品有可能会在色谱柱析出，毁坏柱子。

2. 为什么测试结果跟预期分子量差别较大？

第一，gpc的测试原理是每种流动相都有对应的一种标准物质作出的标准曲线，样品测试结果要跟标曲比较，然后得出测试结果，所以大多数流动相得到的结果是样品的相对分子量，如果样品跟标准品差别太大的话，测试结果就有可能跟真实值相差较大；第二，GPC一般测试样品都是聚合物，预期分子量只是基于实验设计的一个预期值，所以有时候跟实际情况有出入也是正常的。

3. 相对分子量和绝对分子量的区别？

相对分子量：一种物质的分子量与其他物质的分子量之比。例如，氢气的相对分子量是2.016。这是一种基准，当比较其他元素的分子量时，可以使用该标准。

绝对分子量：指一种物质的分子量，是一种绝对值，不与其他物质对比。绝对分子量受摩尔质量的影响，比如氢气的摩尔质量为2.016，所以它的绝对分子量也是2.016。

具体区别如下：

第一，测试原理不同：相对分子量时通过建立标准物质的标准曲线，待测样品与之相比得到分子量分布；绝对分子量是通过三联检测器，主要是激光检测器在样品颗粒表面散射角度不同通过数学模型计算分子量分布；

第二，检测器不同：相对分子量主要是折光示差检测器，绝对分子量需要示差，浓度，激光三联检测器；

第三，检测分子量范围不同：相对分子量可以检测较小分子量，而一般分子量在几万以上才适合绝对分子量。