圆二色光谱仪CD
仪器型号: BRIGHTTIME Chirascan, JASCO810,Jasco-815
1、【液体CD制样要求】
(1)测试时需要空白溶剂做对照扣背景,麻烦样品及溶剂至少各备5ml;
(2)样品及溶剂的浓度对测试影响较大,不宜过高或过低(浓度过高,会超电压,数据不准;浓度过低,没有信号):不同物质,最佳浓度不同,测试时不对浓度进行摸索
a,如之前测过CD或有相关文献,建议按对应浓度准备;
b,如没测过CD或无文献,但扫过紫外全谱,建议优选紫外浓度的一半配制样品,如不合适再调整(直接用紫外对应浓度,测CD的话浓度偏高);
c,如以上均无,建议按0.5mg/ml来配(蛋白质样品,浓度一般0.1-0.5mg/ml),但无法保证该浓度合适
2、【固体CD制样要求】
固体CD需要10-20mg,如果样品透过率不好,建议采用积分球模式。
1、测试数据以txt或Excel呈现,可自己通过origin作图得到类似下图的结果:
2、我们也可以提供二级结果解析(收取一定费用),包含α折叠,β折叠,无规则卷曲等百分含量占比
1、不知道CD的合适浓度该如何选择呢?
答:如果没测过CD或无文献,但扫过紫外全谱,建议优选紫外浓度的一半配制样品,如不合适再调整。
2、空白溶剂需要扣除背景,空白样品是算一个样品吗?
答:不算,空白溶剂仅背景扣除,不加收任何费用(液体样)。
3、我的溶剂没有5mL可以测吗?
答:条件不苛刻的前提下是可以的,最少需提供2mL。
4. 下单时,空白样品是否算一个样品?
不算,空白溶剂仅对照用,不另外收费
5. 溶剂或空白对测试的影响有哪些?
液体CD:每种溶剂都有截止波长(可以网上查询),测试范围的最小波长不能低于溶剂的截止波长。(例如乙醇的截止波长205nm,则测试范围最小能到205nm)。缓冲液的浓度过高(一般不高于5mM),很可能在190-200nm会有吸收,从而影响结果。
固体CD:用于压片的溴化钾在195nm以下会有吸收,氯化钾在190nm以下会有吸收,对应的测试范围也只能到195nm或者190nm。