HE染色/特殊染色
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仪器型号: 迈瑞兽用全自动血液细胞分析仪 型号：BC-30Vet，标本包埋切片染色，生物方案定制，包埋切片等
HE染色送样要求：
包埋：石蜡包埋、OTC包埋。
标本要求：已固定在4％多聚甲醛中的动物组织，或已固定在FAA中的植物组织。
送样要求：
a. 动物组织：处死动物后立即取材，生理盐水冲洗表面，4%的多聚甲醛固定，一般组织固定48h左右进行包埋最好，大小不超过1cm*1cm*0.5cm，装组织的管子一定要比组织大，固定液是样品体积的5倍以上，以保证充分固定，封口膜封好避免运输过程中固定液洒出。
b. 植物组织：新鲜取材后固定于FAA固定液中，大小不超过1cm*1cm*0.5cm，如果组织悬浮于固定液上，可以抽真空使其下沉。
注：常温或少量冰袋运输。
切片：石蜡切片、冰冻切片。
标本要求：已包埋的动物/植物组织 。
（2）送样要求：
石蜡包埋的组织：冰袋运输。
OTC包埋的组织：干冰运输。
染色: 脱蜡至水、苏木素染色、伊红染色、脱水封片。
标本要求：切片。
送样要求：
石蜡切片：石蜡切片码齐装在塑料切片盒中，冰袋运输。
冰冻切片：冰冻切片码齐装在塑料切片盒中，干冰运输。
拍照：光学拍照（白光）、数字扫描（白光）
标本要求：已染色的切片。
送样要求：已染色的切片，常温或少量冰袋运输。
1、HE染色
2、Masson染色
3、甲苯安蓝染色
4、番红固绿染色
5、油红 o 染色
6、pas 染色
7、AB-PAS染色
8、天狼猩红
1. 非特异性杂交：
- 问题：杂交信号中非特异性的背景增加。
- 解决：使用更高浓度的非放射性同源DNA或RNA来竞争，减少非特异性的结合。
2. 杂交信号弱：
- 问题：杂交信号不强，无法得到清晰的定位或定量结果。
- 解决：增加探针浓度，调节杂交条件，减少洗涤强度，使用更敏感的检测系统。
3. RNA降解：
- 问题：RNA稳定性差，容易被降解。
- 解决：使用最佳固定剂和条件，避免使用过度的蛋白酶K消化。
4. 组织或细胞渗透性差：
- 问题：探针不易渗透到组织或细胞中。
- 解决：增加切片前的处理步骤，如使用蛋白酶消化或增加切片厚度。
5. 探针稳定性问题：
- 问题：探针的稳定性不足，容易降解。
- 解决：使用稳定的探针，冷冻干燥储存，避免多次冻融。
6. 杂交不均匀：
- 问题：不同区域的杂交信号不一致。
- 解决：确保杂交液完全覆盖样品，并且杂交过程中保持恒定的温度和湿度。
7. 背景染色：
- 问题：染色过程中产生非特异性的背景染色。
- 解决：增加洗涤步骤，使用特异性更强的抗体和探针。
8. 信号定位不准确：
- 问题：杂交信号的定位不够精确。
- 解决：选择更适合的探针标记物，优化杂交和洗涤条件。
9. 探针设计不当：
- 问题：探针与目标序列的互补性不佳。
- 解决：设计特异性更强、更稳定的探针。
10. 实验操作错误：
- 问题：操作不当导致实验结果偏差。
- 解决：严格遵守操作规程，进行实验培训，详细记录所有步骤。
11. 光照或化学损伤：
- 问题：样本在检测过程中受到损伤。
- 解决：使用适当的遮光保护，缩短光照时间。
12. 检测系统的灵敏度不足：
- 问题：使用的检测系统灵敏度不足以检测到弱信号。
- 解决：考虑更换更灵敏的检测系统或增加信号放大步骤。
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