ELISA
仪器型号: 生物方案定制，上海-天能-Tanon 5200（全自动化学发光图像分析系统），ELISA等
1、血清：干燥管（黄色）或促凝管（红色）收集全血，室温自然凝固10-20min，离心5-10min（2500-3500rpm/min）。采血过程中应避免溶血，仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心；
2、血浆：抗凝管（紫色、黑色、绿色）收集全血，采集后马上混匀，静置10min左右，离心5-10min（2500-3500rpm/min）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心；
3、尿液：用无菌管收集，离心10-20min（2500-3500rpm/min），仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心；
4、粪便：用无菌15ml离心管收集, 1g样本+9ml PBS（0.01M，pH=7.4），充分匀浆完离心5-10min（2500-3500rpm/min），取上清备用；
5、细胞：检测分泌性的成份：用无菌管收集，5-10min（2500-3500rpm/min），仔细收集上清；细胞内指标：吸去培养板内的培养基，胰酶消化细胞，收集细胞沉淀，PBS（0.01M，PH=7.4）清洗一次，PBS稀释细胞悬液，细胞浓度达到1×107个/ml左右，充分研磨后超声裂解（或反复冻融），以使细胞破坏并放出细胞内成份，离心5-10min（2500-3500rpm/min），取上清备用
6、动物组织：用无菌15ml离心管收集, 组织重量不能低于50mg，1g组织加入9ml PBS（0.01M，PH=7.4），手工或匀浆器将标本匀浆充分，匀浆过程中，PBS分2次加进去，这样匀浆更充分。充分匀浆完离心5-10min（2500-3500rpm/min）。取上清备用（切勿加入细胞裂解液）
7、植物组织：用无菌15ml离心管收集, 组织重量不能低于50mg，1g组织加入9ml PBS（0.01M，PH=7.4），手工或匀浆器将标本匀浆充分，匀浆过程中，PBS分2次加进去，这样匀浆更充分。充分匀浆完离心5-10min（2500-3500rpm/min）。取上清备用（切勿加入细胞裂解液）
8、待测指标试剂盒（可由公司代购），待测样品（若不能及时检测，请将样品保存于-20℃或按照相应说明书要求进行保存，长期保存于-80℃，避免反复冻融）
酶标仪检测出现白板，无信号情况，该如何解决？
原因：试剂已过保护期，不同批次稀释液交叉使用；洗板机或加样过程中酶标记物被污染失活，稀释液中含有酶抑制剂；洗涤剂是浓缩型，没有按比例稀释。
为什么显色灵敏度低，仅有微弱信号出现？
原因：洗涤剂稀释倍数不符合要求，洗板次数过多，洗板冲击力太大，洗板浸泡时间过长；底物显色太短。
是否可以使用试剂盒未推荐的样本类型进行检测？
试剂盒说明书内指定的样品类型是经过验证的，超出范围的样品类型是未经过检测验证的，因此请慎重选择并及时咨询试剂厂商。
