下单：荧光显微镜
常见问题
荧光显微镜
仪器型号: 尼康倒置显微镜ECLIPSE Ti2-E，日本-尼康-倒置荧光显微镜尼康（TS2），德国-徕卡-Leica DM6B，全片荧光扫描仪-NIKON Eclipse 80i 荧光，荧光显微镜等
样品要求
1. 不同样本送样量或大小要求
细胞：冻存的细胞或用25平方厘米培养瓶长到70%加满培养基室温固定好寄送；
细菌：用20%甘油+80%菌液低温保存；直接拍摄需要封片后常温避光邮寄。
液体类：根据测试时样本浓度和检测时间点而定，按照单次检测需要的3-5倍的量寄送；最好溶解在PBS（磷酸盐缓冲液）中；若采用稀释后样本测试，则须告知稀释倍数及工作液浓度；若溶剂为有机溶剂（如DMSO，醇类，酚类等），最高工作液浓度中，溶剂的占比低于0.5%。
粉末类：可溶液粉末，注明溶剂的种类，当样品对溶剂有特殊需求时，请在送样时附加所需溶剂；能够溶于PBS/水/DMSO中；不可溶粉末：注明样本性质，灭菌方式，及分散为均匀悬浮液所需必要步骤
块体：直接拍摄的样品长宽不超过20mm，或直径不超过10mm，厚度不超过5mm；膜最好500um以下，基底厚度没要求；需标出测试面。
2. 提供清楚激发/发射波长，拍摄倍数等要求信息；若需要染色，需要注明染色剂种类，标明染料名称和拍摄条件（激发/发射波长）
测试案例
常见问题
激光共聚焦拍照和普通荧光显微镜拍照有什么不同？
共聚焦用激光作为光源，光电倍增管做检测器，逐点扫描，对应每个像素其能量比较高；汞灯虽然总功率高，但属于场照明，对应每个像素的能量并没有激光高。激光共聚焦有针孔，可以排除焦平面上焦点以外及非焦平面杂散光的影响，因为空间分辨率提高，但因为是每个像素每个像素逐点扫描，采集较慢，一张图并不是同一时间采集的，时间分辨高不高；CCD拍照取的是样本的同一时间。
平台可提供染色剂及收费
| 染料名称 | 染色剂使用费 | 最大激发波长（nm） | 激发器波长（nm） | 发射波长/范围（nm） | 结合物质 |
| AO染色液 | 20 | 490 | 488 | 与DNA的结合，其荧光发射峰为530nm;与RNA的结合，其荧光发射峰为640nm | DNA/RNA |
| CFSE | 20 | 498 | 488 | 517 | 染活细胞 |
| DAPI | 20 | 359 | 405 | 457 | 可染DNA/RNA |
| FITC | 20 | 491 | 488 | 516 | 非特异性蛋白染料可染蛋白/氨基酸/糖类 |
| H33342 | 20 | 352 | 405 | 454 | 可染DNA、核酸 |
| Hoechst33258 | 20 | 352 | 405 | 454 | 细胞核染料 |
| Hoechst33342 | 20 | 352 | 350 | 454 | 细胞核染料 |
| Nile red (NR) | 20 | 559 | 559 | 635 | 可染脂质 |
| PI | 20 | 537 | 514（559) | 615 | 可染细胞核 |
| 罗丹明B | 20 | 546 | 561 | 580 | 非特异性蛋白染料 |
| 耐尔蓝A | 20 | 631 | 633 | 660 | 非特异性蛋白 |
| 溶酶体红色荧光探针 | 150 | 561 | 561 | 592 | 溶酶体 |
| 溶酶体绿色荧光探针 | 150 | 501 | 488 | 509 | 溶酶体 |
| 线粒体绿色荧光探针 | 150 | 490 | 488 | 512 | 线粒体 |
| 线粒体红色荧光探针 | 150 | 578 | 561 | 598 | 线粒体 |
| 线粒体深红色荧光探针 | 150 | 641 | 633 | 662 | 线粒体 |
| Calcein-AM/PI | 50 | 501（537） | 488（559） | 521（615） | 可染活细胞/死细胞 |
| ConA-FITC | 50 | 491 | 488 | 516 | α多糖 |
| ConA-iFlour 555 | 50 | 557 | 561 | 570 | α多糖 |
| ConA-Alexa Fluor 594 | 50 | 590 | 561 | 618 | α多糖 |
| Calcofluor white | 50 | 350 | 405 | 432 | 可染β-D-吡喃葡萄糖多糖 |
| DCFH-DA | 50 | 504 | 488 | 525 | 可染ROS |
| DiD | 50 | 646 | 633 | 663 | 细胞膜染料 |
| Dil-细胞膜橙红色荧光探针 | 50 | 550 | 561 | 567 | 细胞膜染料 |
| DiO-细胞膜绿色荧光探针 | 50 | 483 | 488 | 501 | 细胞膜染料 |
| SYBR GreenⅠ | 50 | 498 | 488 | 522 | 核酸 |
| 罗丹明123 | 50 | 508 | 488 | 528 | 测线粒体膜电位 |
| FITC-鬼笔环肽 | 100 | 491 | 488 | 516 | 可染细胞骨架 |
| SF633标记鬼笔环肽 | 100 | 630 | 633 | 650 | 细胞骨架 |
| 罗丹明-鬼笔环肽 | 100 | 540 | 514 | 565 | 可染F-肌动蛋白 |
| Syto63 | 100 | 657 | 633 | 673 | 可染全部细胞 |
| Syto9 | 100 | 485 | 488 | 498 | 可染DNA/RNA |
| Syto9/PI | 100 | 485（537） | 488（559） | 521（616） | 可染活细菌/死细菌 |
荧光染料激发/发射波长参考于https://www.aatbio.com/fluorescence-excitation-emission-spectrum-graph-viewer | |||||
浸提液常用国标ISO 10993-12 2007介绍
| 浸提液制备标准-表面积/浸提液体积 | ||
| 厚度（mm） | 浸提比例 （表面积或体积） ±10% | 材料形式举例 |
| ＜0.5 | 6 cm2/ml | 薄膜 |
| 0.5-1.0 | 3 cm2/ml | 金属薄片、硅片 |
| ＞1.0 | 1.25 cm2/ml | 金属块 |
| 不规则固体材料 | 0.2 g/ml | 粉末、粒状、泡沫、非吸收剂 |
| 不规则多孔材料 (低密度材料) | 0.1 g/ml | 薄膜、海绵 |
| 注意：目前还没有标准的浸提方法来测试吸收剂和吸水溶胀的水溶胶类样本。 | ||
